在生活当中物体透光是非常常见的,例如我们的玻璃它也是透光物体的一直,我们可以通过它观看到后边的事物。还有我们人才喝的水,它也是一种透光液体,我们可以观看购买的矿泉水,它是晶莹剔透的通过肉眼几乎看不到里面有什么杂质。人们在日常评判水的质量很多都是通过颜色来判别的。那么如果要进行更细微的判别就可以通过分光光度法对透明介质的透光率和色度进行测试,从而实现对产品的颜色质量管控。下面小编就来简单的介绍一下分光光度法测量水色度的应用。
一、分光光度法测水样色度:
纯水为无色透明,清洁水在水层浅时应为无色,在深层时为浅蓝绿色。天然水中存在腐殖质、泥土、浮游生物、铁和锰等金属离子,均可使水体着色。生活污水和工业废水中,常含有大量的染料、生物色素和有色悬浮颗粒等,这些有色废水常给人以不愉快感,排入环境中使水体着色,减弱水体透光性,影响水生生物的生长。为了测试水样色度,就可以采用分光测色仪来进行测量。
由于不同水样对光有选择性的吸收效应,只吸收光谱中某一波长范围的光,而让其他波长的光透过。因此,当用白光照射不同颜色的水样时,就会呈现不同的颜色。
分光测色仪应用分光光度法原理,照明光线直接进入积分球,在积分球内形成漫反射的白光,这种漫反射白光照射到样品上,通过样品的吸收和散射作用,在与样品垂直的方向上射出积分球,进入单色器分光,最后由检测器测得分光后每一波长下的光能,以参比白标准的反射能量为基准,计算并输出样品的分光反射率或分光透射率。根据色度学原理,转换为色度数值,从而实现对水样的色度测试。
二、分光光度法测透光率和色度的关系:
一束光通过材料后入射光强发生变化的现象就称为吸收。透射光与入射光强度之比称为透光率,所谓透过率曲线就是透过率沿不同波长的分布。如果忽略入射光在材料表面的散射(镜面反射或漫散射),透过率曲线也代表了材料对入射光的吸收,根据公式:透过率+吸收率=1,就可以获得相应的吸收光谱。
分光光度计利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特性波长的光而产生的吸收光谱。按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法。
分光光度法的基本原理与光电比色法相同,不同之处仅在于获得单色光的方法不相同。分光光度法是采用棱镜或光栅等分光器进行分光,所获得的单色光的波长范围比滤光片要窄得多,一般半宽度在5~10nm。由于单色光纯度高,因而测定的灵敏度、选择性和准确度都较光电比色法高。由于可以任意选取某种波长的单色光,故在一定条件下,利用吸光度的加和性,可以同时测定试液中两种或两种以上的组分。因为入射光的波长范围扩大了,测量范围不局于可见光区和有色溶液,可扩展到紫外光区、红外光区。所以,许多无色物质只要在紫外光区或红外光区内有吸收峰,都可以用分光光度法进行测定。
三、分光度法是什么:
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。如以波长(λ)为横坐标,吸收强度(A)为纵坐标,就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法,称为分光光度法,也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法;用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法。它们与比色法一样,都以Lambert-Bee定律为基础。